厭氧鐵氨氧化反應(yīng)是在厭氧條件下由微生物驅(qū)動(dòng)的氨氧化鐵還原反應(yīng)，是關(guān)注的熱點(diǎn)之一。該文探究厭氧鐵氨氧化反應(yīng)對(duì)實(shí)際污水的處理效果，以三類污水(城市生活污水、農(nóng)村生活污水及礦山廢水)為研究對(duì)象，在試驗(yàn)中添加厭氧鐵氨氧化菌液，研究厭氧鐵氨氧化反應(yīng)對(duì)這三類污水中氨的去除效果。論文選題有一定的意義，試驗(yàn)方法正確，分析結(jié)果合理，對(duì)類似研究有一定的參考作用。

根據(jù)2015年中國(guó)環(huán)境質(zhì)量公報(bào)，我國(guó)廢水氨氮排放總量已達(dá)229.9萬(wàn)噸。對(duì)于城鎮(zhèn)污水處理廠，現(xiàn)有的廢水處理工藝難以進(jìn)一步提高對(duì)含高濃度氨氮廢水的除氮效率。而對(duì)于工業(yè)廢水，其中往往含有重金屬，會(huì)降低廢水處置過(guò)程中的微生物活性，導(dǎo)致除氮效率不高。傳統(tǒng)的廢水脫氮工藝通過(guò)硝化和反硝化過(guò)程實(shí)現(xiàn)脫氮;與之相比，厭氧氨氧化不需要大量曝氣，并且能在一個(gè)反應(yīng)器內(nèi)直接實(shí)現(xiàn)脫氮[6]。因此近年來(lái)厭氧氨氧化細(xì)菌及以據(jù)此建立的廢水脫氮工藝一直是學(xué)者們研究的熱點(diǎn)。

隨著厭氧反應(yīng)研究的深入，不少研究者發(fā)現(xiàn)，在厭氧條件下一些金屬化合物可以作為電子受體將氨氮氧化。Luther等發(fā)現(xiàn)錳可以將土壤中的氨氮氧化;Gilson等在厭氧細(xì)菌培養(yǎng)試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)U(Ⅵ)可以作為電子受體參與氨氧化反應(yīng)等。2005年，Clement等在美國(guó)新澤西州的濕地土壤中發(fā)現(xiàn)Fe(Ⅲ)氧化氨氮現(xiàn)象;2006年，日本學(xué)者Sawayama在固定床反應(yīng)器中以厭氧環(huán)境下鐵的絡(luò)合物(Fe(Ⅲ)-EDTA)作為電子受體，將氨氮氧化，并將此反應(yīng)現(xiàn)象定義為厭氧鐵氨氧化反應(yīng)。隨后Yang等和Ding等分別在熱帶雨林土壤和水稻土中發(fā)現(xiàn)厭氧鐵氨氧化反應(yīng)。2013年，Huang等給厭氧鐵氨氧化下了一個(gè)定義，即厭氧鐵氨氧化是以鐵氧化物作為電子受體，將氨氮作為電子供體，在厭氧的條件下實(shí)現(xiàn)氨氧化的過(guò)程。

隨后的研究表明，這種反應(yīng)由細(xì)菌Acidimicrobiaceae bacterium A6(簡(jiǎn)稱A6)所驅(qū)動(dòng)。厭氧鐵氨氧化反應(yīng)和A6的發(fā)現(xiàn)，給厭氧條件下氨氧化工藝處理污水提供了新的思路。Huang等利用A6及好氧氨氧化細(xì)菌建立混合反應(yīng)器，將水中的氨氮最終轉(zhuǎn)化為氮?dú)猓瑥亩_(dá)到脫氮的目的。李祥等利用污水廠活性污泥嘗試馴化能從事氨氧化、鐵還原的菌種，在馴化期間氨氮最大轉(zhuǎn)化率為59.7%。這些研究中，厭氧鐵氨氧化反應(yīng)能對(duì)模擬污水有較好的除氮效果，但目前關(guān)于厭氧鐵氨氧化菌處理實(shí)際污水還鮮有報(bào)道。

為此，本研究選擇廣西壯族自治區(qū)欽州市污水廠處理污水、欽州市小欖江水和廣東省汕尾市廢棄硫鐵礦廢水3類實(shí)際廢水進(jìn)行研究。欽州污水處理廠接收欽州市的城市生活污水，進(jìn)入生化池前的污水含有較高濃度的氨氮。小欖江位于欽州污水處理廠旁，接收四周農(nóng)田的面源污染。汕尾廢棄硫鐵礦是90年代封礦的硫鐵礦區(qū)，但由于地表徑流作用，流經(jīng)廢棄硫鐵礦區(qū)的地表水中含有硫鐵礦物。而硫鐵礦物中的Fe(Ⅲ)或許可以作為厭氧鐵氨氧化反應(yīng)的電子受體。本文擬通過(guò)對(duì)比厭氧鐵氨氧化菌對(duì)這三種廢水中的氨氮的去除效果，研究厭氧鐵氨氧化菌在不同實(shí)際污水中的氨氮氧化效率，以期為厭氧鐵氨氧化菌處理實(shí)際污水提供參考。

1試驗(yàn)材料與方法

1.1試驗(yàn)裝置和運(yùn)行條件

試驗(yàn)運(yùn)行裝置：經(jīng)高溫滅菌、規(guī)格為250 mL的血清瓶，硅膠塞與螺旋蓋密封瓶口。

裝置運(yùn)行條件：血清瓶放置在氣浴恒溫震蕩箱中，溫度恒定為25 ℃，轉(zhuǎn)速為150 r/min。試驗(yàn)污水加入血清瓶前經(jīng)高純氬氣曝氣20 min以除去DO。

1.2厭氧鐵氨氧化細(xì)菌來(lái)源本

研究中的厭氧氨氧化活性污泥菌落是項(xiàng)目組的前期研究成果，來(lái)自于大寶山森林土，以氨氮(NH4+)和Fe(Ⅲ)富集培養(yǎng)得到具有較高厭氧鐵氨氧化反應(yīng)速率的菌落。細(xì)菌培養(yǎng)液中含有的氮元素及鐵形態(tài)如表1所示。

1.3試驗(yàn)污水理化性質(zhì)分析

試驗(yàn)污水分別為廣西壯族自治區(qū)欽州市污水處理廠的生化池進(jìn)水、欽州市小欖江水以及廣東省汕尾市廢棄硫鐵礦區(qū)的地表水。三種試驗(yàn)污水的基本理化性質(zhì)如表2所示。由于汕尾廢棄硫鐵礦污水的pH值比較低，本研究根據(jù)厭氧鐵氨氧化菌生長(zhǎng)的適宜pH，在汕尾廢棄硫鐵礦污水中加入氫氧化鈉(1 mol/L)，將污水pH調(diào)至4.5，后作為第四種試驗(yàn)廢水參與整個(gè)研究(如表2所示)。

1.4測(cè)定項(xiàng)目與分析方法

分析方法參見(jiàn)文獻(xiàn)。NH4+-N采用納氏試劑分光光度法;NO2--N采用N-(1-萘基)-乙二胺分光光度法;NO3--N采用紫外分光光度法;總氮(TN)以NH4+-N、NO2--N和NO3--N三者之和表示。COD采用哈希DRB200、DR20800消解測(cè)定儀;pH采用奧克斯ST300便攜式pH計(jì);DO采用奧克斯ST300便攜式溶解氧測(cè)定儀。

Fe(Ⅱ)和總鐵測(cè)定采用菲啰啉分光光度法。在pH為4~9時(shí)，菲啰啉與水中的Fe(Ⅱ)反應(yīng)生成穩(wěn)定的配合物，該配合物在波長(zhǎng)為562 nm時(shí)有最大吸收。總鐵測(cè)定時(shí)，水中的Fe(Ⅲ)先用鹽酸羥胺還原成Fe(Ⅱ)，再用菲啰啉分光光度法測(cè)定。

1.5試驗(yàn)方法

200 mL污水經(jīng)濾紙過(guò)濾后，倒入250 mL滅菌血清瓶中。加入約15 mL的厭氧鐵氨氧化菌液和5 mL三價(jià)鐵氧化物(5.36 mmol/L)。每個(gè)厭氧培養(yǎng)瓶通入氬氣充分曝氣20 min后放置厭氧培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)。一組試驗(yàn)水樣設(shè)置3個(gè)平行樣及不添加菌液的空白樣。對(duì)每個(gè)厭氧培養(yǎng)瓶在培養(yǎng)第0 h、12 h、24 h、36 h、2 d、5 d、6 d、7 d、8 d、10 d分別取水樣5 mL。為避免空氣中的氧氣將水樣中的Fe(Ⅱ)氧化，保證測(cè)量的準(zhǔn)確性，將血清瓶放入?yún)捬跖囵B(yǎng)箱中取樣。試驗(yàn)水樣及空白水樣使用孔徑為0.22 μm的針筒濾膜過(guò)濾至10 mL無(wú)菌離心管內(nèi)，隨后測(cè)定NH4+-N、NO2--N、NO3--N、Fe(Ⅱ)、總鐵等指標(biāo)。

2結(jié)果與討論

2.1欽州污水廠進(jìn)水中氮元素及鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)化

欽州污水處理廠除接收市鎮(zhèn)生活污水外，也接收部分水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)廢水。水產(chǎn)養(yǎng)殖廢水一般含有較高濃度的氨氮，因此試驗(yàn)開始前，該污水的氨氮濃度相對(duì)較高。在純厭氧的培養(yǎng)條件下，加入菌液的污水氨氮濃度明顯降低，10 d內(nèi)由初始的203.94 mg/L降低至122.26 mg/L。而未加菌液的污水，氨氮略有下降，原因是欽州污水廠進(jìn)水偏堿性，在堿性條件下，污水中的氨離子轉(zhuǎn)化成游離氨移至氣相中，導(dǎo)致未加菌液的污水氨氮也略有下降。另外添加菌液的污水中，硝態(tài)氮的濃度由初始的0.12 mg/L升高至37.17 mg/L，而未加菌液的污水硝態(tài)氮的變化并不明顯(如圖1所示)。對(duì)比未加菌液的污水，加菌液污水中的硝態(tài)氮明顯升高。亞硝態(tài)氮在培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有明顯的升高，與未加菌液的污水變化趨勢(shì)相近。由氮元素守恒定律說(shuō)明加入菌液的污水中，氨氮被氧化成硝態(tài)氮，轉(zhuǎn)化的量為37.13 mg/L。加入菌液后污水的總氮變化如圖2所示，在0~6 d內(nèi)由204.10 mg/L降低至157.94mg/L，而6~10d總氮沒(méi)有明顯變化。污水中的總氮下降，且污水處于厭氧狀態(tài)，說(shuō)明部分氨氮可能被氧化成氮?dú)猓D(zhuǎn)化量為44.55 mg/L。

圖1 欽州污水廠進(jìn)水中氮元素的轉(zhuǎn)化：(a)未加菌液;(b)添加菌液

圖2 欽州污水廠進(jìn)水中總氮的變化

欽州污水廠進(jìn)水中鐵的形態(tài)轉(zhuǎn)化如圖3(a)所示，F(xiàn)e(Ⅱ)濃度由初始的0.15 mg/L升高至42.98 mg/L，而總鐵的含量一直維持在60 mg/L左右，說(shuō)明在細(xì)菌生長(zhǎng)的過(guò)程中，污水中的Fe(Ⅲ)被還原成Fe(Ⅱ)。在厭氧條件下，氨氧化和鐵還原同時(shí)發(fā)生，表明污水中厭氧鐵氨氧化反應(yīng)比較明顯，污水中的氨氧化過(guò)程是厭氧鐵氨氧化反應(yīng)的作用。

通常情況下，自然界中的氨氧化反應(yīng)由好氧氨氧化和厭氧氨氧化組成。本試驗(yàn)為純厭氧培養(yǎng)條件，說(shuō)明不存在好氧氨氧化反應(yīng)。而厭氧氨氧化伴隨著明顯的鐵還原，說(shuō)明氨氧化主要是由厭氧鐵氨氧化反應(yīng)來(lái)完成。本試驗(yàn)并不能排除原有污水可能存在厭氧氨氧化細(xì)菌，但未加菌液污水作為對(duì)照組，僅發(fā)現(xiàn)少量氨減少的現(xiàn)象，說(shuō)明厭氧氨氧化反應(yīng)不是試驗(yàn)中氨氧化減少的主要原因。也就是說(shuō)，厭氧鐵氨氧化反應(yīng)在欽州污水處理廠污水中的表現(xiàn)活躍，是造成污水中氨氮減少的主要原因。另一方面也說(shuō)明厭氧鐵氨氧化反應(yīng)可用于同類生活污水中的氨氮去除。

圖3 三種類型的污水添加菌液后鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)化：(a)欽州污水處理廠進(jìn)水;(b)欽州小欖江水;(c)汕尾廢棄硫鐵礦污水;(d)調(diào)整pH值后的汕尾市廢棄硫鐵礦污水

2.2欽州小欖江水中氮元素及鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)化

欽州小欖江水中氮的轉(zhuǎn)化如圖4所示。在培養(yǎng)過(guò)程中氨氮的變化分成兩個(gè)階段：第一階段為氨氮升高階段(0~5 d)，在此階段，污水中的氨氮濃度由初始的105.73 mg/L升至5 d時(shí)的113.58 mg/L，加入菌液的污水中氨氮和總氮均升高，原因可能是菌液中部分細(xì)菌死亡，釋放出氨氮，導(dǎo)致污水中的氨氮和總氮升高;第二階段為氨氮下降階段(5~10 d)，污水中的氨氮濃度由5 d時(shí)的113.58 mg/L降至10 d時(shí)的98.97 mg/L，與此同時(shí)，5~10 d內(nèi)，水中的硝態(tài)氮沒(méi)有明顯變化，而亞硝態(tài)氮由0.05 mg/L增長(zhǎng)至0.37 mg/L。根據(jù)加入菌液后總氮的變化(如圖5所示)得出，水中減少的氨氮部分轉(zhuǎn)化為NO2--N，另一部分極可能轉(zhuǎn)化為氮?dú)?，轉(zhuǎn)化量為6.44 mg/L。

圖4 欽州小欖江水氮元素的轉(zhuǎn)化：(a)未加菌液;(b)添加菌液

圖5 欽州小欖江水中總氮的變化

與氨氮變化相對(duì)應(yīng)的，欽州小欖江水中鐵的形態(tài)轉(zhuǎn)化也可以分為兩個(gè)階段，如圖3(b)所示：在第一階段(0~5 d)，F(xiàn)e(Ⅱ)由初始的0.47 mg/L降至0.1 mg/L;第二階段(5~10 d)，F(xiàn)e(Ⅱ)由0.1 mg/L增至1.32 mg/L，且氨氮降低，說(shuō)明此時(shí)污水中發(fā)生了厭氧鐵氨氧化反應(yīng)。由此可知，厭氧鐵氨氧化反應(yīng)發(fā)生在培養(yǎng)期的第二階段(5~10 d)。

2.3汕尾廢棄硫鐵礦污水中氮元素及鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)化

汕尾硫鐵礦廢水中氮元素和鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)化如圖3(c)和圖6所示。對(duì)比未加菌液的污水，加菌液污水中的氨氮在0~10 d內(nèi)逐步升高;而硝態(tài)氮和亞硝態(tài)氮沒(méi)有明顯變化。這說(shuō)明在汕尾廢棄硫鐵礦廢水中并沒(méi)有發(fā)生厭氧鐵氨氧化反應(yīng)。Huang等在研究中得出適宜厭氧鐵氨氧化菌生長(zhǎng)pH范圍是4~5，而加入菌液的汕尾廢棄硫鐵礦廢水的初始pH為2.5，遠(yuǎn)低于厭氧鐵氨氧化細(xì)菌的最佳生長(zhǎng)范圍，這可能導(dǎo)致了細(xì)菌在一開始就已經(jīng)死亡。

圖6 汕尾廢棄硫鐵礦污水氮元素的轉(zhuǎn)化：(a)未加菌液;(b)添加菌液

圖7 汕尾廢棄硫鐵礦污水中總氮的變化

調(diào)節(jié)pH后汕尾廢棄硫鐵礦污水氮元素的轉(zhuǎn)化和總氮的變化如圖8和圖9所示。未加菌液污水中，氮元素與總氮10 d內(nèi)呈下降趨勢(shì)，由67.97 mg/L下降至37.64 mg/L，而加菌液污水中的硝態(tài)氮和亞硝態(tài)氮均無(wú)明顯變化。調(diào)節(jié)pH后的加菌液廢棄硫鐵礦污水中，鐵形態(tài)的轉(zhuǎn)化如圖3(d)所示，F(xiàn)e(Ⅱ)濃度由初始的14.92 mg/L升高至36.63 mg/L，而總鐵的含量一直維持在85 mg/L左右，可見(jiàn)經(jīng)過(guò)pH調(diào)節(jié)后，加菌液硫鐵礦廢水也能利用厭氧鐵氨氧化反應(yīng)氧化廢水中的氨氮。另外，加入菌液15 d后瓶中的污水pH和COD去除率分別為6.13和37.82%。根據(jù)式(1)~(3)，厭氧鐵氨氧化反應(yīng)是一個(gè)消耗酸度的過(guò)程，會(huì)導(dǎo)致瓶中的pH上升。同時(shí)，瓶中生成的Fe(Ⅱ)會(huì)導(dǎo)致COD的去除率偏低，實(shí)際瓶中的COD去除率略高于測(cè)得的37.82%。根據(jù)《污水綜合排放標(biāo)準(zhǔn)》(GB 8978-1996)，污水pH排放標(biāo)準(zhǔn)為6～9，經(jīng)厭氧鐵氨氧化反應(yīng)處理15 d后，調(diào)節(jié)pH的汕尾廢棄硫鐵礦污水可以達(dá)到排放標(biāo)準(zhǔn)。

圖8 調(diào)節(jié)pH后汕尾廢棄硫鐵礦污水中氮元素的轉(zhuǎn)化：(a)未加菌液;(b)添加菌液

2.4厭氧鐵氨氧化在四種污水中對(duì)氨氮和總氮去除效果

由表3可知，添加菌液后氨氮轉(zhuǎn)化速率大小依次是欽州污水廠進(jìn)水、調(diào)節(jié)pH后汕尾硫鐵礦廢水和小欖江水，平均速率分別為8.17g˙m-3˙d-1、3.04g˙m-3˙d-1和0.68g˙m-3˙d-1。與氨氮轉(zhuǎn)化速率大小類似，總氮去除率也是欽州污水廠進(jìn)水>調(diào)節(jié)pH后汕尾硫鐵礦廢水>小欖江水，速率分別為4.4g˙m-3˙d-1、2.95g˙m-3˙d-1和0.65g˙m-3˙d-1。在本試驗(yàn)中，三種污水加入菌液后氮?dú)舛际前钡闹饕D(zhuǎn)化產(chǎn)物。欽州污水廠水、小欖江污水和調(diào)節(jié)pH后汕尾硫鐵礦廢水分別為59.94%、89.70%和97.67%。而在10d內(nèi)欽州污水廠進(jìn)水、小欖江污水和調(diào)節(jié)pH后汕尾硫鐵礦廢水加入菌液后氨氮轉(zhuǎn)化率分別為40.05%、12.86%和44.64%。

本試驗(yàn)中，厭氧鐵氨氧化對(duì)欽州污水廠進(jìn)水和調(diào)節(jié)pH后的汕尾硫鐵礦廢水在10 d內(nèi)氨氮的去除率分別為40.05%和44.64%，這與前人文獻(xiàn)中的30.57%~59.7%類似。通常情況下，模擬污水成分簡(jiǎn)單，條件優(yōu)化(合適的碳氮比、適中的pH條件等)，因此在模擬試驗(yàn)時(shí)往往能得到比實(shí)際污水更好的處理效果。例如李祥等通過(guò)將活性污泥通入模擬廢水，探究鐵還原氨氧化的過(guò)程，得到氨氮的最大轉(zhuǎn)化率為59.7%。Huang等采用模擬廢水培養(yǎng)厭氧鐵氨氧化細(xì)菌，10 d內(nèi)氨氮的轉(zhuǎn)化率為45.32%，高于本試驗(yàn)的結(jié)果，除采用模擬污水的原因外，還可能因廢水起始氨氮濃度約為30.81 mg/L，遠(yuǎn)低于本試驗(yàn)的起始氨氮濃度203.94 mg/L。另一方面，Sawayama采用固定床反應(yīng)器培養(yǎng)厭氧鐵氨氧化細(xì)菌，10 d內(nèi)的最大氨氮轉(zhuǎn)化率為30.57%，比本試驗(yàn)及其他研究都低，可能是因?yàn)槠涫且訣DTA-Fe(Ⅲ)的方式添加Fe(Ⅲ)，不利于細(xì)菌的直接利用。而小欖江水在10 d內(nèi)的氨氮轉(zhuǎn)化率為12.86%，遠(yuǎn)低于欽州污水廠進(jìn)水和調(diào)節(jié)pH后的汕尾硫鐵礦廢水，其主要原因可能是小欖江水受到附近農(nóng)業(yè)污染的影響，屬于農(nóng)業(yè)源廢水;而農(nóng)業(yè)源廢水長(zhǎng)期缺乏有效管理，污染物成分復(fù)雜，并常常伴有農(nóng)藥和化肥污染，這些污染物影響了厭氧鐵氨氧化細(xì)菌的活性，導(dǎo)致厭氧鐵氨氧化反應(yīng)速率降低。

目前文獻(xiàn)報(bào)道的厭氧鐵氨氧化反應(yīng)的氨氮轉(zhuǎn)化產(chǎn)物主要有N2、NO2-和NO3-。在污水處理中，氨氮只有轉(zhuǎn)化成氮?dú)猓拍軐?shí)現(xiàn)真正意義上的脫氮;當(dāng)厭氧鐵氨氧化反應(yīng)中氨氮的氧化產(chǎn)物為氮?dú)鈺r(shí)，厭氧鐵氨氧化反應(yīng)能直接實(shí)現(xiàn)廢水脫氮。本試驗(yàn)中，三種廢水加入氨氮后的主要產(chǎn)物為氮?dú)?，其比例分別為59.94%、87.70%和97.67%。在下一步的研究中，可以考慮將厭氧鐵氨氧化與反硝化或厭氧氨氧化結(jié)合，從而獲得更好的脫氮性能。

3結(jié)論

(1)在欽州污水處理廠污水中投加厭氧鐵氨氧化菌能發(fā)生厭氧鐵氨氧化反應(yīng)，使污水中的氨氮降低，10 d時(shí)達(dá)到最大轉(zhuǎn)化率40.05%，轉(zhuǎn)化產(chǎn)物主要是硝態(tài)氮和氮?dú)狻?/p>

(2)在欽州小欖江水中投加厭氧鐵氨氧化菌，在5 d開始發(fā)生厭氧鐵氨氧化反應(yīng)，氨氮的轉(zhuǎn)化量為22.61 mg/L，此時(shí)氨氮的主要轉(zhuǎn)化產(chǎn)物是氮?dú)狻?/p>

(3)在汕尾硫鐵礦廢水中投加厭氧鐵氨氧化菌后并不能直接進(jìn)行厭氧鐵氨氧化反應(yīng)，將廢水pH調(diào)至4.5后，加入菌液后發(fā)生厭氧鐵氨氧化反應(yīng)，10 d時(shí)達(dá)到最大氨氮轉(zhuǎn)化率44.64%

(4)這些結(jié)果表明城市生活污水和農(nóng)村生活污水可以提供厭氧鐵氨氧化反應(yīng)所需的環(huán)境，可作為厭氧鐵氨氧化實(shí)際應(yīng)用的潛在處理對(duì)象。而礦區(qū)污水不滿足厭氧鐵氨氧化反應(yīng)所需直接條件，需要適當(dāng)調(diào)節(jié)污水條件才能應(yīng)用厭氧鐵氨氧化處理。

來(lái)源:凈水技術(shù)  作者:李海暉等 

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